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Ctrl キーを押しながらクリックしているときに、ツリービューで既に選択されているノードの選択を解除すると問題が発生します。すでに選択されているノードに対して Ctrl キーを押しながらクリックしても、イベントはトリガーされません。そのため、Ctrl+クリックを押して、ツリービューで既に選択されているノードの選択を解除したかったのです。
よろしく。
TreeView1.Items[i].Selected = false; を使用できます。